简介：目的构建具有高效转染率且含有标记基因的携带白介素4受体拮抗剂（IL-4RA）基因的重组逆转录病毒载体pLNC-IL-4RA。方法将IL4RA基因插入pLNC—Laz逆转录病毒载体获得重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL-4RA，重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL4RA通过质脂体转染PA317细胞进行包装，PA317抗性克隆经过G418的抗性筛选产生并扩增，将含有病毒的PA317细胞培养液上清收集后转染NIH3T3细胞进行病毒滴度的测定。结果扩增后的G418抗性克隆经过检测和滴度测定结果显示含有目的基因的逆转录病毒最高的病毒滴度为1×10^4CFU／mL。选择含有最高病毒滴度的PA317细胞抗性克隆进行基因组的提取和鉴定，结果显示目的基因IL-4RA成功地整合到了宿主的基因组中。结论含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒载体经过PA317细胞包装后获得了较高的病毒滴度，为下一步哮喘模型的基因治疗打下了基础。

简介：

简介：摘要目的观察探析护理干预对艾滋病患者高效抗逆转录病毒治疗效果的影响。方法在2015年3月-2017年3月间收治的艾滋病患者中选择120例纳入研究，所有患者均接受高效抗逆转录病毒治疗，依据信封法分为2组，对照组采取常规护理，观察组增加实施护理干预，各60例。结果观察组机会性感染率为5.0%、诊疗依从率为96.7%、CD4+T细胞计数为（208.5±14.6）个/μL，均明显优于对照组（P＜0.05）。结论对实施高效抗逆转录病毒治疗的艾滋病患者实施护理干预可有效降低患者的机会性感染率，提高患者的诊疗依从性以及免疫功能，值得推广。

简介：目的：构建含Ubc9的逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系,深入研究SUMO化修饰的作用。方法：聚合酶链反应（PCR）扩增获取目的基因Ubc9,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVneo,形成重组质粒pMSCV-Ubc9;脂质体法将pMSCV-Ubc9转染逆转录病毒包装细胞PT67;G418筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒感染NIH3T3细胞。结果：限制性酶切和测序鉴定证实Ubc9正确插入逆转录病毒表达载体。G418筛选获得稳定产毒的抗性细胞克隆,收获病毒能有效感染NIH3T3细胞。结论：携带Ubc9基因的重组逆转录病毒表达载体pMSCV-Ubc9构建成功,转染PT67细胞后包装出重组逆转录病毒,进而筛选获得了能转录表达Ubc9的产毒细胞系PT67-Ubc9。

简介：木薯是世界第三大薯类作物,所产淀粉广泛用作食品和工业原料,是重要的粮食和经济作物。木薯蔗糖合酶是将光合同化物蔗糖向淀粉转化的第一个关键酶,前期本课题组通过酵母单杂交分析发现αNAC可能是木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的调控因子,本研究在此基础上获得了αNAC基因转录序列并克隆其编码序列,发现编码蛋白具有典型的NAC和UBA保守结构域。αNAC基因在木薯地上部叶和地下部块根肉中转录活性较高,为β-actin基因的5%~25%,在施用外源激素条件下转录活性显著上调,其中茉莉酸达到峰值时间最短,水杨酸次之,乙烯、脱落酸、赤霉素和生长素较长。此外,在MeSuSy1Promoter::GUS的转化株中二次过表达αNAC基因,发现二次转化株中GUS酶活显著低于单价转化株,表明过表达αNAC基因可以显著抑制木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的转录活性。

简介：[摘要]目的：探讨在妊娠合并艾滋病治疗中应用抗逆转录病毒药物治疗的临床疗效及安全性。方法：收集我院80例自2021.10-2022.9期间收治的妊娠合并艾滋病孕妇，通过随机数字表法将孕妇分成对照组和观察组，40例/组，对照组孕妇采用替诺福韦+拉米夫定+洛匹那韦/利托那韦抗逆转录病毒药物治疗方法，观察组采用齐多夫定+拉米夫定+洛匹那韦/利托那韦抗逆转录病毒药物治疗方法，比较两组新生儿HIV感染率及不良反应发生率。结果：观察组新生儿感染HIV率及不良反应发生率与对照组对比无显著差异（P＞0.05）。结论：将抗逆转录病毒药物运用到妊娠合并艾滋病患者临床治疗中，能够有效降低新生儿HIV感染率及不良反应发生率，切实保障母婴身体健康及生命安全，值得临床推广。

简介：为了探讨逆转录多重PCR方法在检测具有正常核型的急性白血痛（AL）患者的易位相关融合基因中的价值，应用包括19种染色体易位特异性引物对的逆转录多重PCR方法对37例经常规细胞遗传学方法揭示为正常核型的AL患者进行了检测。结果表明：有8例（21．6％）AL患者分别检测出有PML／RARA、AML1／ETO、CBFB／MYH11和BCR／ABL等4种融合基因的存在。结论：逆转录多重PCR可在核型正常的AL患者中检出隐匿的染色体易位，故凡常规细胞遗传学显示为核型正常的AL患者，均应对其进行逆转录多重PCR检测。

简介：摘要目的观察分析高效抗逆转录病毒疗法治疗艾滋病患者的疗效与安全性，为临床上合理的选择用药提供依据。方法选取我院2015年1月-2018年6月接收的86例艾滋病患者作为本次的研究对象，将其随机分为例数相同的两组对照组和观察组，每组各有患者43例。对照组患者采用传统疗法治疗，观察组采用高效抗逆转录病毒疗法治疗。比较两组患者的临床疗效以及不良反应情况。结果观察组患者的临床总有效率为90.70%，明显高于对照组的74.42%，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组不良反应发生率为20.93%，明显低于对照组的39.53%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论高效抗逆转录病毒疗法治疗艾滋病患者的临床效果显著，安全性较高，具有在临床上进行广泛推广应用价值。

简介：【摘要】： 目的 观察分析 高效抗逆转录病毒疗法治疗艾滋病患者的疗效与安全性，为临床上合理的选择用药提供依据 。方法 选取我院 2015 年 1 月 - 2018 年 6 月接收的 86 例艾滋病患者作为本次的 研究对象， 将其随机分为例数相同的 两组：对照组和观察组，每组各有患者 43 例 。对照组患者 采用传统疗法治疗 ，观察 组采用高效抗逆转录病毒疗法治疗。比较两组患者的临床疗效以及不良反应情况。 结果 观察组患者的临床总有效率为 90.70% ，明显高于对照组的 74.42% ，差异有统计学意义（ P<0.05 ）。观察组不良反应发生率为 20.93% ，明显低于对照组的 39.53% ，差异有统计学意义（ P<0.05 ）。 结论 高效抗逆转录病毒疗法治疗艾滋病患者的临床效果显著，安全性较高，具有在临床上进行广泛推广应用价值 。

简介：摘要目的分析2019年广西胸科医院抗逆转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）病毒抑制失败患者HIV-1基因型耐药发生水平及特征。方法收集2019年1月1日—12月31日接受ART≥6个月且病毒载量≥1 000 copies/mL的成人病毒抑制失败患者血浆提取核酸，采用美国雅培ViroSeq方法进行基因型耐药检测。结果共有131例病毒抑制失败患者获得pol基因片段序列。74例（56.5%）对至少一类病毒抑制剂耐药。核苷类逆转录酶抑制剂（nucleoside reverse transcriptase inhibitors，NRTIs）和非核苷类逆转录酶抑制剂（non-NRTIs，NNRTIs）最常见的突变位点分别为M184（42.0%）和K103（37.4%）。8例（6.1%）和15例（11.5%）分别对NRTIs和NNRTIs产生单类药物耐药，49例（37.4%）对NRTIs和NNRTIs产生双重耐药，1例（0.8%）对NRTIs、NNRTIs和蛋白酶抑制剂PIs产生三重耐药。多因素logistic回归分析显示，与耐药发生存在显著性关联的因素有治疗前CD4+T淋巴细胞计数<200个/μl（AOR=4.57，95%CI：1.28~16.30）、抗病毒治疗时间6~35个月（AOR=12.87，95%CI：3.36~49.33）及≥60个月（AOR=5.95，95%CI：1.75~20.22）。对常用药物拉米夫定（3TC）、齐多夫定（AZT）、替诺福韦（TDF）、阿巴卡韦（ABC）、利匹韦林（RPV）、依非韦伦（EFV）、奈韦拉平（NVP）和洛匹那韦/利托那韦（LPV/r）的获得性耐药所占比例分别为39.7%、6.9%、10.7%、19.1%、6.9%、45.0%、49.6%和1.5%。结论广西胸科医院56.5%的ART病毒抑制失败患者出现获得性耐药，超过1/3病例同时对NRTIs和NNRTIs双重耐药。定期随访评价治疗效果，加强依从性教育，对耐药发生病例及时更换治疗药物方案，提高ART效果。

简介：Puma为一种凋亡调控因子。本研究探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者p53上调pumamRNA的表达情况，并探索其在评估CLL预后中的意义。采用基于SYBRGreenI荧光染料法的实时定量逆转录PCR（qRT—PCR）方法检测100例CLL患者及11名健康对照者外周血标本中puma基因的表达，以β-actin为内参照，用2（-△Ct）方法计算puma的相对定量值，组间分析采用秩和检验。结果显示，qRT—PCR标准曲线的R^2均≥0．990，批内差及批间差变异系数（CV）均小于5％，灵敏度可达10^2copies／μgRNA。100例CLL患者puma基因表达水平中位数为1．038×10^-3（4．106×10^-4-2．806×10^-3）；11名健康对照者puma表达水平中位数为1．220×10^-3（7．233×10^-4-1．405×10^-3），二者无显著性差异（U=544．5，P=0．957）。临床分期较早（Binet分期A期）的患者puma表达水平明显高于临床分期较晚（Binet分期B期、C期）的患者（p〈0．001）；具有CD38表达阳性、ZAP-70蛋白表达阳性、血清乳酸脱氢酶水平增高、血清β2-微球蛋白水平增高的患者，其puma基因表达水平均明显低于无以上不良预后因素的患者，差异显著（P值分别为0．002，0．012，0．009和0．046）；FISH检测显示存在12号染色体三体和14q32易位的患者puma表达水平明显低于无以上分子遗传学异常者，其差异显著（P值分别为0．003和0．045）。结论：qRT-PCR方法检测puma表达灵敏可靠，puma表达水平与CLL多种预后因素存在相关性，在评估CLL预后中具有重要价值。

简介：摘要目标观测看护管理干涉对艾滋病人的有效抗逆转录病毒治疗（HAART）疗效的影响，进而评论它的安全系数。办法是把120名艾滋病人随意的分作两个小组，对照小组的60个人应用日常询问，干涉小组在对照小组的基础上应用安全系统的看护管理干涉，对比两个小组病人的治愈依从性与治疗结果。结果是受到干涉的小组治疗依从性与生活的品质明显优秀于对照小组（P<0.05）；被干涉小组连续两年表现出它的访失访率比对照小组的低，对于病毒的阻碍能力也显然比对照小组的高（P<0.05）。结论看护管理很显然可以提升艾滋病人HAART依从性，加强治愈的结果，提升生活的整体水平。

简介：摘要：因人类免疫缺陷病毒所致的免疫缺陷性疾病——艾滋病具有较高的传染性，且不可治愈，在当前社会普遍关注。本文将对艾滋病患者肠道微生态与抗逆转录病毒治疗及耐药性进行全面综述。

简介：【摘要】目的 研究高效抗逆转录病毒疗法治疗艾滋病患者的效果。方法：数据取自本院2018年1月-2021年12月收治的80例艾滋病患者，“双盲法”分基础组(常规疗法)、高效组(高效抗逆转录病毒疗法)各40例，两组疗效比较。结果：治疗前比较免疫状态无差异，治疗后比较不良反应无差异，P>0.05；治疗后较基础组，高效组IgA、IgG、IgM指标更高，有效率更高，P

简介：本文介绍一种从血浆中提取高纯度浓缩的抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）的工艺：通过低温乙醇处理血浆，得到的沉淀经肝素－琼脂糖两次亲和吸附，并透析，浓缩，用此方法提纯的ATⅢ经丙烯酰胺凝胶电泳，等电聚焦电泳分析，显示所提取的ATⅢ为单一成分，等电点为5．2，从血浆开始计算的ATⅢ回收率为8．5％。

简介：酶的传统概念受到挑战，有确凿的试验证据证实能作为催化剂的还有RNA和DNA。

简介：一谭方一听说吃饭就开始发憷。前两天,他和一名同事跟随支队长刘成岭到青县公安局指导案件侦破。有刘成岭坐镇和统筹,案件很快就破了。县局摆宴庆功,抒发众将士心中高兴。当晚,县公安局马局长当仁不让在主陪落座,亲热地把刘成岭拉到身边,然后招呼谭方他们就位。马局长催促服务员赶快打开酒瓶,亲自为刘成岭倒上满满一玻璃杯。等马局长的酒瓶移过来,谭方忙用手虚掩酒杯,说马局我不会喝酒。

简介：

简介：目的观测转染增强型绿色荧光蛋白基因（enhancedgreenfluorescentproteingene,EGFP）并稳定表达前后兔骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs）的生物学特性,探讨利用EGFP作为体内试验示踪剂的可行性.方法利用pLEGFP-N1逆转录病毒载体质粒转染PT67包装细胞,提取病毒上清液后感染BMSCs,G418筛选及单克隆培养得到稳定表达绿色荧光蛋白的BMSCs细胞.比较转染前后BMSCs的生长曲线,细胞活性和贴壁率.结果获得了稳定表达绿色荧光蛋白的BMSCs,其生物学特性无明显改变,荧光有效表达时间达3个月.结论利用逆转录病毒法转染EGFP可作为BMSCs体内示踪.

简介：目的：探讨转录水平基因沉默（TGS）技术和转录后水平基因沉默（PTGS）技术对肝素酶（HPA）基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA（siRNA），并转染肝癌细胞SMMC-7721；实时半定量PCR和Westernblotting检测TGS和PTGSsiRNA转染后48、72和96hHPA的表达，并设空白组作为对照；Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果TGS和PTGS两种技术在转染48h后，从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达；转染后72h，PTGS组HPA恢复表达，而TGS组仍保持沉默；转染后96h，两组HPA均恢复表达。Transwell小室实验表明，TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少，TGS组效果更明显。结论TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术，并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。